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一、游離氨基酸的測定公式
1. 氨基酸測定法
氨基酸測定法是一種常見的測定游離氨基酸的方法,其原理是利用氨基酸測定試劑盒,將蛋白質(zhì)樣品與試劑盒中的氨基酸反應(yīng),生成可檢測離子,然后通過檢測離子濃度來測定樣品中的氨基酸含量。
常用的氨基酸測定試劑盒包括氫氧化鈉(NaOH)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、硫酸(SO4)2、磷酸二氫鉀(K2HPO4)和氯化鐵(FeCl3)等。其中,氫氧化鈉和碳酸氫鈉用于去離子化,硫酸和磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH值,氯化鐵用于檢測氨基酸離子。
2. 空白溶液的制備
在氨基酸測定中,空白溶液是必不可少的。空白溶液是指未參與測定的溶液,用于防止干擾和保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。通常,空白溶液的制備方法是將空白樣品(通常是指水)進(jìn)行稱量,然后將其倒入盛有一定量的氫氧化鈉和碳酸氫鈉的試劑瓶中,用氣球泵將其攪拌至 溶解。最后,將試劑瓶進(jìn)行清洗并晾干即可。
需要注意的是,制備空白溶液時(shí)應(yīng)該控制好溶液的質(zhì)量和濃度,以確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。一般來說,空白溶液的濃度應(yīng)該盡量接近樣品中氨基酸的濃度,并且應(yīng)該使用高質(zhì)量的試劑,以避免因試劑質(zhì)量差異導(dǎo)致測定結(jié)果的誤差。
二、空白溶液的作用
空白溶液的作用主要有以下幾點(diǎn):
1. 防止干擾
在氨基酸測定中,樣品中的其他蛋白質(zhì)、氨基酸和雜質(zhì)可能會(huì)與試劑盒中的氨基酸反應(yīng),導(dǎo)致測定結(jié)果的誤差。因此,制備空白溶液可以有效地防止這種干擾。
2. 保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性
空白溶液制備過程中,氫氧化鈉和碳酸氫鈉可以去除樣品中的離子,硫酸和磷酸二氫鉀可以調(diào)節(jié)pH值,氯化鐵可以檢測氨基酸離子,這些步驟都可以保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
